TC含量檢測試劑盒的使用

　　總膽固醇(TC)含量檢測試劑盒的原理：
 

　　TC 包括游離膽固醇和膽固醇酯，TC 是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇 (FC) 和游離脂肪酸 (FFA)，從而把膽固醇酯 轉化為 FC；進一步利用膽固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-膽甾烯酮和 H2O2；最后利用過氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物；在 500nm 有特征吸收峰，其顏色深淺與 TC 含量成正比。
 

　　總膽固醇(TC)含量檢測試劑盒操作步驟:
 

　　一、TC 的提取:
 

　　1、組織中TC 的提取:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:510的比例(建議稱
 

　　取約0.1g 組織，加入1mL 試劑一)進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清，即
 

　　TC待測液。
 

　　2、 細胞、細菌中TC 的提取:先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內，棄上清，加1mL
 

　　試劑一，超聲波破碎1min(強度20%，超聲2s，停1s)，8000g4℃離心10min，取上
 

　　清，即TC 待測液。
 

　　3、 血清(漿)等樣品:直接測定。
 

　　二、測定操作:
 

　　1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到500nm，蒸餾水調零。
 

　　2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
 

　　3.標準管:在1mL玻璃比色皿中依次加入50μLTC 標準品和150uLTC 工作液，混勻。
 

　　靜置24h 后于500nm處比色，記為A標準管。
 

　　4.測定管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待測液和150μLTC 工作液，混勻，
 

　　靜置24h后于500nm 處比色，記為A測定管。
 

　　注意:標準管只需測定一次。